HIV實驗室的樣品采集和處理方法
華銳凈化 2019-11-06 13:04:12 閱讀
HIV實驗(experiment)室的樣品采集和處理方法:
艾滋病檢測最常用的樣品是血液,包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時也可作為測試(TestMeasure)樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下:
血清樣品采集和處理
1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量靜脈血,室溫下自然放置1~2小時,待血液凝固(solidification)、血塊收縮后再用3、000r/min離心15min,吸出血請備用。凈化實驗室控制系統(tǒng)是整個潔凈實驗室安全運行的神經中樞,由于潔凈實驗室-生物安全實驗室的實驗對象是危險性的微生物,出于嚴格控制污染的原則,它要求以最少的維護人員,運用最優(yōu)化的管理維護手段,來實時監(jiān)控每一個實驗室中設備所處的物理環(huán)境,保證實驗室運行過程中始終處于相對負壓環(huán)境,防止危險性微生物外泄。
2如用濾紙(Filter Paper)片采樣,則手指或耳垂局部(part)嚴格按常規(guī)進行消毒,在刺破皮膚,迅速把濾紙(Filter Paper)片沾上,切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。
抗凝血樣品采集和處理
1用加有抗凝劑的真空采血管(或一次性注射器抽去靜脈血,轉移至加有抗凝劑的試管),反復輕搖,分離血漿和血細胞(blood cell)備用。實驗室凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)必須可靠運行,采用先進技術,合理利用和節(jié)約能源與資源,保證環(huán)境的質量和安全,為實驗人員提供所需要的溫度和濕度,保障生物實驗在安全的條件下進行,以確保實驗結果得準確性。潔凈實驗室主要用于微生物學、生物醫(yī)學、生物化學、動物實驗、基因重組以及生物制品等研究使用的實驗室統(tǒng)稱潔凈實驗室-生物安全實驗室。無菌試驗室、生物安全實驗室由主實功能驗室與其他實驗室及輔助功能用房組成。
2應根據實驗(experiment)要求選用適當的抗凝劑,如CD4+/CD8+T淋巴細胞測定可選用K3EDTA或肝素或檸檬酸鈉(Sodium),HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測可選用K3EDTA或枸櫞酸鈉(Sodium)。
3用于核酸定性檢測時,采集的抗凝全血應在4~8h內分離PBMC和血漿,否則應在24~48h內分離血漿和血細胞(blood cell)。(病毒載量測定不同方法對樣品的要求見第四章4.1中表2;CD4+/CD8+T淋巴細胞測定樣品采集要求見第五章4.1。) 2.1.3 采集樣品注意事項
3.1采集樣品原則上應按臨床采血技術標準操作(試劑盒有特殊要求)。
3.2采集樣品時應注意安全,建議采用真空采血管及蝶形針具,以避免直接接觸血液;直接接觸HIV感染者/艾滋?。ˋIDS)病人血液/體液的操作,應帶雙層手套。